Для чего используется метод полимеразной цепной реакции? Как можно обойти проблемы неспецифического синтеза при ПЦР? И как применение молекулярных колоний сможет увеличить эффективность диагностики? Об этом рассказывает доктор биологических наук Александр Четверин.
В данном подходе главное — определенные молекулы ДНК и РНК, которые хотят обнаружить и которые ассоциированы с какой-то болезнью, например, с инфекцией, со СПИДом или раком — чтобы сделать одиночные молекулы видимыми, потому что их напрямую никто не может видеть, а если их размножить и наблюдать продукт размножения, можно определить, есть ли в организме такие молекулы или нет.
Оказывается, благодаря использованию молекулярных колоний можно увеличить чувствительность диагностики примерно в 100 тысяч раз по сравнению с той ПЦР, которая в настоящее время используется в клинической практике. Также можно увеличить и специфичность, потому что здесь есть возможность смотреть за одиночными колониями и увидеть их развитие во времени, то есть как они из маленьких становятся большими. Таким образом можно точно отличить истинные молекулярные колонии от светящегося «мусора», который не изменяется во времени, и таким образом значительно повысить чувствительность, надежность и точность диагностики.
К сожалению, в России нет ни одной компании или фирмы, которая хотела бы подхватить этот метод, который является уникальным изобретением и опережает по своему технологическому уровню то, что сейчас есть на Западе. А в США его пока не хотят использовать из-за того, что очень многие фирмы вложились в разработку ПЦР, в частности, количественной ПЦР, жидкостной ПЦР — ее называют «real-time PCR», «ПЦР в реальном времени» — и они хотят сначала окупить свои затраты, получить прибыль от ПЦР.
